有關這些試劑的選用與數量是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。 若以上述藥學組合物總重量為基準，本發明化合物，特別是I7457或是I7557，約占該藥學組合物總重量的0.1%至99%(重量%)。 在某些實施方式中，本發明化合物的量至少約為該藥學組合物總重量的1%。
在美國三種最常見的非小細胞肺癌為肺腺癌/支氣管肺泡癌(35~40%)、鱗狀細胞癌(25~30%)及大細胞肺癌(10~15%)。 細胞週期分析自培養基中取得經培育之細胞(不論是否經過本發明之化合物(即，I7457 or I7557)預先處理)，接著，在4℃下以75%冰冷的酒精處理該些細胞至少經過一夜，使細胞固定。 之後，在室溫下以A型RNA酶處理細胞約30分鐘，離心後將細胞沉澱物重新懸浮在適量的碘化丙啶(20 μg/ml)中，然後以流式細胞儀測定出不同週期的細胞並計數其數目。 抗病毒藥物的實例包括，但不限於，金剛烷胺、金剛乙胺及其他類似物。 減輕疼痛藥物的實例包括，但不限於，對乙醯胺基酚(如，對乙醯胺基苯酚)、非固醇類抗發炎藥物(如，水楊酸鹽)及鴉片樣藥物(如，嗎啡及鴉片)。
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圖3是戈氏副擬桿菌菌株MTS01在增加帶有肺癌之小鼠的體重上的效用之數據圖。 由圖3可見，與正常對照組相較之下，病理對照組小鼠的體重增加有顯著的降低。 化學藥物治療 然而，與病理對照組相較之下，實驗組小鼠的體重增加 隨著同時餵食本發明戈氏副擬桿菌菌株MTS01而有顯著的增加，而比較組的小鼠則無此現象。 化學藥物治療 本實施例的結果顯示，本發明戈氏副擬桿菌菌株MTS01可有效地改善LLC引起的個體體重減輕的問題。 該小鼠係飼養在無特定病原體的設施中，並按照美國國立衛生研究院的指導原則進行治療。
使用YCFA培養基進行培養，在厭氧室中於37℃在50mL的YCFA培養基中培養24小時。 透過在4℃下以8,000×g離心10分鐘獲得細胞沉澱物。 透過將經培養的細菌細胞懸浮於無氧PBS中(具有最終細胞密度為1×109CFU)來製備用於口服投藥的細胞懸浮液。
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戈氏副擬桿菌菌株MTS01在增加帶有肺癌之小鼠的平均存活時間上的效用評估 本實施例中使用的實驗動物、戈氏副擬桿菌、迪氏副擬桿菌及路易氏肺癌之種類及培育方式是相同於實施例1所記載者。 如請求項15所述之方法，更包含在施用該有效量如請求項9所述之6-甲基磺醯己基異硫氰酸酯或其藥學上可接受鹽類之後，再對該胰臟癌施以放射線處理。 6-甲基磺醯己基異硫氰酸酯(6-methylsulfonylhexyl isothiocyanate)於製造用以治療癌症之醫藥品的用途，上述癌症係選自由胰臟癌、慢性骨髓白血病、非小細胞肺癌及食道癌所組成之群組。 如請求項7所述之方法，更包含在施用該有效量如請求項1所述之6-甲基亞磺醯己基異硫氰酸酯或其藥學上可接受鹽類之後，再對該胰臟癌施以放射線處理。 6-甲基亞磺醯己基異硫氰酸酯(6-methylsulfinylhexyl isothiocyanate)於製造用以治療癌症之醫藥品的用途，上述癌症係選自由胰臟癌、慢性骨髓白血病、非小細胞肺癌及食道癌所組成之群組。
亦可將本發明之上述醫藥品或藥學組合物製成多種適用於黏膜給藥的劑型，如經頰和/或舌下藥物劑型單元，以遞送藥物穿過口腔黏膜。 可使用多種生物可降解且藥學可接受的高分子輔劑，此種輔劑可使得藥學組合物具有可接受的吸附效果以及所欲的藥物釋放模式，且可和經頰和/或舌下藥物劑型單元中所含的欲施用活性成分或其他成分相容。 一般來說，上述的高分子輔劑包含親水性聚合物，其可黏附至口腔黏膜的濕潤表面。 高分子輔劑的實施例包括但不限於丙烯酸聚合物與共聚物；水解聚乙烯醇；聚乙烯氧化物；聚丙烯酸酯；乙烯聚合物與共聚物；聚乙烯吡咯啶；葡萄糖；瓜膠；果膠；澱粉；及纖維素聚合物。 在某些實施方式中，上述本發明之醫藥品或是藥學組合物中更包括另一種已知可改善癌症治療效果的藥劑。
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每天可施用至個體身上之本發明化合物的有效用量約為10、20、30、40、50、60、70、80、90或100毫克/公斤個體體重；較佳是約30-70毫克/公斤個體體重，例如約30、40、50、60、70毫克/公斤個體體重。 在某些實施方式中，所述方法更包含在對該個體施用I7457或是I7557之後，再對該癌症施以放射線處理。 戈氏副擬桿菌菌株MTS01在活體內不同時間點抗肺癌上的效用評估 本實施例中使用的實驗動物、戈氏副擬桿菌、迪氏副擬桿菌及路易氏肺癌之種類及培育方式是相同於實施例1所記載者。
然而，與病理對照組相較之下，實驗組小鼠的肺腫瘤數目有顯著的減少。 本實驗結果顯示，本發明戈氏副擬桿菌菌株MTS01可抑制肺腫瘤生長。 一種用來延緩活體外多數癌症細胞生長的方法，包含施用一有效量如請求項9所述之6-甲基磺醯己基異硫氰酸酯或其藥學上可接受鹽類，其中該癌症為胰臟癌、慢性骨髓白血病、非小細胞肺癌或食道癌。 一種用來延緩活體外多數癌症細胞生長的方法，包含施用一有效量如請求項1所述之6-甲基亞磺醯己基異硫氰酸酯或其藥學上可接受鹽類，其中該癌症為胰臟癌、慢性骨髓白血病、非小細胞肺癌或食道癌。
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因此，可將這兩種異硫氰酸酯類化合物，作為能治療癌症之醫療藥劑的先導化合物。 使用異硫氰酸酯類來治療癌症之方法及用途 本揭示內容是有關於某些小分子的新穎用途，特別是異硫氰酸酯類化合物的新穎用途，其可用來製造能治療癌症的醫藥品或藥學組合物。 綜上所述，本發明戈氏副擬桿菌可藉由增加帶有肺癌之個體的存活率、平均存活時間、及體重，並抑制肺腫瘤生長，達到治療肺癌之功效。 戈氏副擬桿菌菌株MTS01在抑制肺腫瘤生長上的效用評估 本實施例中使用的實驗動物、戈氏副擬桿菌、迪氏副擬桿菌及路易氏肺癌之種類及培育方式是相同於實施例1所記載者。 綜上所述，本發明戈氏副擬桿菌之功效在於可藉由增加帶有肺癌之個體的存活率、平均存活時間、及體重，並抑制肺腫瘤生長，達到治療肺癌之功效。
- 因此，本發明兩化合物，I7457與I7557，具有後續開發成抗癌藥物佐劑的潛力。
- 有效濃度依所治療的生物種類或個體差異而可能不同，但可藉由例如濃度遞增試驗以實驗決定其有效濃度。
- 攝護腺癌經常出現骨頭轉移，像是髖關節、脊椎骨、骨盆等處。
- 若以口服方式施用，可將本發明化合物配方成為內含各種輔劑(如微晶纖維素、碳酸鈣、磷酸二鈣及甘胺酸)；各種崩解劑(如澱粉、藻酸及特定矽酸鹽)；以及顆粒黏合劑(如，聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、明膠及相思樹膠)的藥錠。
- 在本文中，「治療(treating或treatment)」一詞意指對癌細胞或一個體施用所述化合物，以使至少45%、50%、55%、60%或65%的癌細胞生長停滯在G2/M週期而延緩癌細胞生長，藉使腫瘤體積縮小。
在本文中，「治療(treating或treatment)」一詞意指對癌細胞或一個體施用所述化合物，以使至少45%、50%、55%、60%或65%的癌細胞生長停滯在G2/M週期而延緩癌細胞生長，藉使腫瘤體積縮小。 化學藥物治療 因此，「治療」一詞在此亦表示殺死癌細胞或誘發癌細胞的細胞凋亡。 可將本發明之上述醫藥品或藥學組合物調製成多種可供局部表面給藥的劑型。 可使用此領域中習知的各種皮膚可接受的惰性輔劑在這類劑型中。 適合皮膚表面施用之配方包括液體、乳霜、乳液、乳膏、凝膠、噴劑、氣霧噴劑、皮膚貼片等類似物。
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結果顯示，無論是Panc-1或BxPc-3細胞株，本發明揭示的兩種化合物，I7457與I7557，在濃度為10 化學藥物治療 μM時，均可有效地增強這些癌細胞株對放射線處理的感受力，亦即可增強放射線處理殺死癌細胞的效果。 因此，本發明兩化合物，I7457與I7557，具有後續開發成抗癌藥物佐劑的潛力。 本實施例亦探究了另一種關鍵有絲分裂蛋白－磷酸化組蛋白H3的表現量。 組蛋白H3只有在細胞進行有絲分裂的過程中才會被磷酸化，因此若細胞停滯在有絲分裂期中，此蛋白的含量會提高。
對81T/VGH細胞而言，細胞存活率分析結果顯示，經過20μM 之I7457與I7557處理48小時後，相較於對照組細胞，兩化合物均能夠有效地減少癌細胞數目至少50%(表5)。 化學藥物治療 類似的結果也出現在BE-3細胞的細胞存活率分析上，I7457與I7557在約20μM的濃度下，即可有效地抑制約50%的癌細胞生長(表6)。 因此，本發明也提供用來治療哺乳類(特別是人類)之癌症的方法，包括對該個體施用所述內含本發明活性化合物之醫藥品或藥學組合物。 這類醫藥品或藥學組合物較佳是以可有效傳送所述組合物中活性化合物的途徑施用至一哺乳類(較佳是人類)身上適當或可產生欲求效果的位置。 化學藥物治療 適當的施用途經可以是例如主動或被動地經口、經鼻、經肺或經皮膜等方式；或是以經腸胃外的方式，如直腸栓劑、皮下注射、靜脈內注射、肌肉內注射、鼻腔內、眼用溶液或軟膏。
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第0圖分別繪示出依據本發明一實施方式，經I7457與I7557處理之抗伊馬替尼之CML K562R細胞中磷酸化組蛋白H3的含量。 細胞週期分析進一步顯示出有至少60%的CML細胞停滯於G2/M期，且處於亞G1(sub-G1)群的細胞族群會隨著I7457或I7557劑量增加而增加(參見表1)。 只有在細胞存活時，才能進行這種還原作用；因此通常會利用MTT分析來評估細胞存活與增殖的能力。 簡言之，使細胞和10或20 μM的試驗化合物(如，I7457 or I7557)接觸48或72小時；之後加入MTT染料(500 μg/ml)，並讓還原反應進行4小時；而後加入500 μl的異丙醇以終止還原反應。 所述實施方式與專有名詞是為了闡述發明內容之用，並非用以限制本揭示內容範疇。 本揭示內容範疇也涵蓋並未特意揭示於此，但習知技藝人士在閱讀過本揭示內容後可輕易推知的其他實施方式。
- 然而，上述治療方式往往會產生副作用，例如化學藥物治療會使病患噁心、嘔吐，嚴重者會有感染及易出血的問題，放射線治療亦會使病患噁心、嘔吐，嚴重者會有掉髮問題。
- 在以下實驗中，對C57BL/6J雄性小鼠在尾靜脈中注射路易氏肺癌細胞(1×106細胞)，然後在整個實驗過程中監測腫瘤的生長及體積。
- 利用已知可干擾有絲分裂細胞中微管形成的有絲分裂抑制劑－諾可唑(nocodazole，用量100 nM)作為陽性對照組。
- 因此，本發明也提供用來治療哺乳類(特別是人類)之癌症的方法，包括對該個體施用所述內含本發明活性化合物之醫藥品或藥學組合物。
- 為此，先依據本文「材料與方法」段落中所揭示的步驟，對上述胰臟癌細胞施以放射線處理，然後再繼續培育殘存的癌細胞，並以細胞群落分析來觀察這些細胞後續形成細胞群落的能力。
- 圖7是戈氏副擬桿菌菌株MTS01在活體內植入LLC細胞之後的第7天之時抗肺癌上的效用之活體分子影像圖。