可藉由各種技術自患者獲得細胞樣本，包括(例如)藉由刮擦或擦拭某區域，或藉由使用針自胸腔、膀胱、椎管、或其他適當的區域吸出體液。 將該等細胞樣本置於溶液中，隨後收集並轉移至載玻片上，以在放大倍率下觀察。 可在該載玻片上之細胞上塗覆固定劑及染色溶液，以為存檔目的及便於檢查而保存樣本。 更進一步來說，綜合第十圖至第十二圖之結果可知，本發明所揭抹草萃取物於濃度200 g/mL或以下時，如200 g/mL、100 g/mL，同時具有最低致死率及較佳抑制血管新生之功效。 量多、白色的雙側乳房分泌物可能起因於泌乳激素過高、腦下垂體腫瘤、服用荷爾蒙、胃藥、身心科藥物、或甲狀腺機能低下等問題。 醫師檢查後可能會抽血檢查泌乳激素，找出乳房分泌物的原因加以治療（包括停止使用部分藥物、或用藥治療荷爾蒙不平衡問題）。
- 由第十九圖A至第十九圖D可知，隨著抹草萃取物濃度上升至250μg/mL，可促使MCF-7 細胞中Rb/E2F 複合體 表現量增加24%、cyclin D1/cdk4 以及cyclin E/cdk2 之結合表現則分別下降26%以及32%。
- 該過濾器固持器組件亦包含圍繞該圓柱體放置且經組態以在該過濾器與該圓柱體之間形成流體密封的一或多個密封構件。
- 通常希望玻片上之該等細胞具有適當的空間分佈，以可 檢查個別細胞。
- 第十八圖D係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞，其內細胞週期蛋白依賴性激酶抑制者之表現及表現量。
- 此施加至翼片34之額外壓力亦使玻片固持器33自第一位置旋轉至第二位置，由此使薄膜28滾動通過玻片56，以實現玻片56與薄膜28之間的完全接觸。
此滾動接觸自薄膜表面輕輕地移除任何過量液體，且實質上防止薄膜28與玻片56之間產生氣泡捕集而不干擾所關注之顆粒的空間分佈。 由於玻片固持器33圍繞第二鉸鏈20旋轉，因此其達到更水平之定向。 在此旋轉期間，頂舉銷38b與其槽孔36之間的相互作用使玻片56之滑動最小化。 在彈簧48上，中心軸42變寬進入軸肩50，其緊靠該彈簧48。
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藉由投予含有一有效劑量之抹草萃取物之組合物至一已接受乳癌治療之患者，係能夠有效抑制乳癌細胞生長，達到提高乳癌預後及降低復發率之功效。 緣是，為能達成上述目的，本發明係揭露一種將抹草萃取物用於製備治療乳癌之組合物之用途。 藉由投予含有一有效劑量之抹草萃取物之組合物至一乳癌患者，係能夠有效抑制乳癌細胞生長，達到治療乳癌或延緩乳癌惡化之功效。 本發明之主要目的係在於揭露一種抹草萃取物之用途，其係具有抑制乳癌細胞生長之能力，以達到治療乳癌及延緩乳癌惡化之功效，並且能夠作為臨床治療乳癌之輔助療法，以達到提高乳癌預後及降低復發率之功效。。
藉由在薄膜28與玻片56之間所實現的緊密完全接觸，可使用(例如)使該薄膜輕微凸起成凸面組態之過濾器30之最小正加壓，容易地轉移其等之間所捕集之受關注顆粒。 為將所關注之顆粒轉移至玻片56而不干擾其空間分佈，希望過濾器30之薄膜28最初接觸小面積的玻片56，以在薄膜28與玻片56之沉積表面之間形成預定之小預接觸角，且然後逐漸輕輕地與玻片56完全接觸。 使用類似於指紋法中所使用之滾動，使玻片56與薄膜28的大部份之間逐漸輕輕地自小面積初始接觸轉變至完全接觸。 根據此等專利案中所揭示之一種方法，樣品容器中之含於防腐劑流體中的患者細胞係使用置於其中之旋轉式樣品收集器而分散。
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第十八圖D係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞，其內細胞週期蛋白依賴性激酶抑制者之表現及表現量。 第十八圖E係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞，其內E2F、p-Rb、Rb之表現及表現量。 第十九圖A係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞，其內Rb/E2F 複合體之表現。 第十九圖B係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞，其內cyclin D1/cdk4之表現。
本發明係提供一種將抹草萃取物用於製備治療乳癌之組合物之用途。 具體來說，藉由投予含有一有效劑量之抹草萃取物之組合物至一乳癌患者，係能夠有效抑制乳癌細胞生長，達到治療乳癌或延緩乳癌惡化之功效。 此外，如圖1所示，將閂鎖58置於第一定位構件22上，以將第二定位構件32固定於第一位置。 因為收集用於分析之細胞樣本通常比傳統的外科病理學步驟(如活組織檢查)創傷性小，所以廣泛地使用細胞技術，藉此使用具有彈簧負載型可轉移探針、固定套管及類似物之專用活組織檢查用針，自患者切除組織樣本。
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該玻片固持器組件係經組態以使固定於該玻片固持器內之玻片與固定於該圓柱體上之過濾器依斜角(例如在約2.5至7.5度之範圍內)進行初始接觸。 該等定位構件較佳係經組態以使該玻片固持器可自該過濾器固持器組件旋離，以利於自該過濾器固持器組件移除過濾器或將過濾器連接至其上。 乳頭分泌物 乳頭分泌物 在一示例性實施例中，該手柄具有把手部份及自該把手部份突出之延伸部份，其中該過濾器固持器組件及玻片固持器組件各自在相隔位置上連接至該手柄之延伸部份。
可通過開放式中心軸42對薄膜28施加真空，且可將控制器置於手柄12上。 一旦樣本經製備、固定及染色，則細胞技術家通常可在放大倍率下及具有或無各種照明源之情況下人工地目視檢 乳頭分泌物 查該樣本。 例如，自動化視覺系統可對其上放置有樣本之整體玻片進行初步評估，以提醒細胞技術家該玻片之可能的最相關區域，從而用於仔細檢查；或可用於再篩選已經細胞技術家分析之樣本。 乳頭分泌物 由第十六圖及第十七圖之結果證實，本發明所揭抹草萃取物具有誘發細胞週期於G0/G1 期停滯作用進而抑制腫瘤生長。
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如請求項5之裝置，該過濾器固持器組件另外包含置於該海綿容器內之海綿，其中該海綿係大於該容器且部份延伸至該開口外。 如請求項4之裝置，該過濾器固持器組件另外包含在該軸肩與該圓柱體之間圍繞該中心軸放置之彈簧，其中該彈簧在該圓柱體朝該軸肩移動時產生往復反向力。 如請求項1之裝置，其中該等定位構件係經組態以使該玻片固持器自該過濾器固持器組件旋離，以利於自該過濾器固持器組件移除過濾器或將過濾器連接至其上。
如圖4中所示，在第二定位構件32內形成四個槽孔36，其中在該第二定位構件32之兩側各形成兩個。 玻片固持器33在與該第二定位構件32內之四個槽孔36之位置相對應的位置上具有四個插銷38。 該等插銷38係插入槽孔36中，以使玻片固持器33樞軸附接至第二定位構件32。 槽孔36係稍大於插銷38，由此允許玻片固持器33相對於第二定位構件32進行某些移動。 當第二定位構件32旋轉至第二位置(圖2)時，外緣40及樞軸銷38a形成第二鉸鏈20(玻片固持器33圍繞其轉動)。 頂舉銷38b與其槽孔36相互作用，以使玻片固持器33在其平面內的滑動降至最低程度。
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由第十六圖B之結果可知，相較於未以抹草萃取物處理之細胞來說，有以抹草萃取物處理之細胞於G0/G1 時期之數量係明顯上升；於抹草萃取物於濃度250 以及500 μg/mL時，則有明顯升高20%的G0/G1 期停滯（arrest）之表現。 由第十六圖C之結果可知，當抹草萃取物於濃度為250 以及500 μg/mL時，對於MCF-7 細胞之生長確實有明顯之抑制作用。 更進一步來說，於抹草萃取物濃度為250 或500 μg/mL，於24或48小時之細胞生長曲線街不再生長。 如同前述實例中所述，將MCF-7 細胞經由不同濃度之抹草萃取物處理24 小時後，以流式細胞儀分析各個細胞週期之分佈情形，並進行量化，結果如第十六圖所示。 如請求項21之裝置，其中該玻片固持器係藉由一或多個可旋轉連接構件連接至該手柄之延伸部份，該等構件係經組態以使該玻片固持器可自該圓柱體旋離，而利於使用該圓柱體。
2.輕觸摸：要輕捏乳頭，看看是否有異常分泌物，尤其是自發性分泌物，指的是不需要持續刺激，很容易流出來。 其實最令人擔心的狀況就是乳頭出血，乳管內乳突瘤是乳頭出血最常見的原因，幸好大部分的乳管內乳突瘤是良性而且單一發生的，但是仍有少數的病人是因為乳癌造成的乳暈出血。 至於乳突瘤、乳癌、乳腺炎等問題，常是造成單側、單孔、量多、血色或黃綠色的異常分泌物。
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秤300 g 之乾燥抹草，磨成粉末狀後，加入1.5L蒸餾水，以100℃煮1小時，收集抹草水萃取物，再加入1.5 L distilled water重複熬煮第二次，重複以上動作三次，將濾液進行冷凍乾燥，得其粉末即為抹草萃取物。 於本發明之實施例中，該抹草萃取物之濃度為至少100μg/mL，其中，又以該抹草萃取物之濃度至為250～500μg/mL為佳，例如250μg/mL、300μg/mL、350μg/mL、400μg/mL、500μg/mL。 於本發明之實施例中，該組合物係為一食品，意即該食品係包含有一抹草萃取物，及一食品製造上可接受之載體。 於本發明之實施例中，該組合物係為一醫藥組合物，意即該醫藥組合物中係包含有一有效劑量之抹草萃取物，及一藥學上可接受之載體或/及賦型劑。 目前臨床上對於乳癌治療是以採取手術切除為主，再輔以化療、放療或荷爾蒙療法等，惟，大多數患者在半年之後會因癌細胞再度增生而使病情惡化，使得目前臨床上對於乳癌治療仍面臨無法降低復發率及死亡率之問題。 雖然目前研究指出降低乳腺管細胞的增生作用被視為是有效預防及治療乳腺癌之方法，但是目前現有治療方法中仍未能提供有效降低乳腺管細胞的增生作用之物質。
因此，自含有諸多細胞之流體樣品製備樣本通常需要首先藉由機械分散、流體剪切、或其他技術將細胞各自分離，以可收集薄單層細胞並沉積於玻片上。 當應用於實驗室環境中時，細胞學者、細胞技術家、及其他醫療專家根據患者細胞樣本的目視檢查對患者的病情進行醫學診斷。 典型的細胞技術係「子宮頸抹片檢查」測試，其中自女性子宮頸刮取細胞並進行分析，以檢測異常細胞(子宮頸癌出現之先兆)的存在。 而由第十三圖至第十五圖之結果推知，本發明所揭抹草萃取物對於乳腺癌細胞係有專一性之抑制生長作用，意即對於正常乳腺細胞之生長無明顯抑制作用。
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呈翼片34形式之致動構件係經附接至第二定位構件32，且用於將該第二定位構件32自如圖1中所示之第一位置手動旋轉至如圖2中所示之第二位置。 該第二定位構件32圍繞第一鉸鏈18旋轉約270度之角度，以自該第一位置移動至該第二位置。 當將額外壓力施加至該翼片34時，該第二定位構件32自該第二位置旋轉至如圖3所示之第三位置。 該第二定位構件32圍繞第一鉸鏈18旋轉270至280度之角度，以自該第一位置移動至該第三位置。
此外，因為在細胞轉移時，玻片固持器33有效地浮在薄膜28與玻片56之界面上所產生之流體軸承上，所以容易調整玻片厚度、薄膜位置、及玻片/薄膜平行度的可變性。 用於製備細胞樣本的裝置 本發明係關於細胞樣本的製法，且更特定而言係關於自患者樣本製備細胞樣本及維持該患者樣本與該樣本之間的一對一相互關係的人工方法及裝置。 由第十九圖A至第十九圖D可知，隨著抹草萃取物濃度上升至250μg/mL，可促使MCF-7 細胞中Rb/E2F 複合體 表現量增加24%、cyclin D1/cdk4 以及cyclin E/cdk2 之結合表現則分別下降26%以及32%。 由第十一圖及第十二圖之結果可知，與濃度為0 g/mL之抹草萃取物相比，血管分支數目隨著抹草萃取物濃度之增加而減少。 具體來說，相較於濃度為0 g/mL之抹草萃取物，當抹草萃取物濃度為100 g/mL，血管新生數量下降43%，而當抹草萃取物濃度為200 g/mL，血管新生數量下降50％以上，而能夠有效抑制血管新生。
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由上述結果可知，抹草萃取物造成MCF-7 細胞週期G0/G1 後期停滯作用。 可自諸如鋁之金屬及諸如聚甲醛(Delrin)之聚合物機械加工樣本玻片製備裝置10之各種部件(例如，第一定位構件22、第二定位構件32、玻片固持器組件16等)。 各種部件係經螺栓及螺桿連接(例如，手柄12及過濾器固持器組件14、第一定位構件22及閂鎖58等)。 其他部份係附接於摩擦或壓縮配件(例如過濾器固持器組件14及過濾器30、處於第一位置之第二定位構件32及閂鎖58等)。 因此，綜合第十三圖至第十六圖之結果顯示，本發明所揭抹草萃取物於濃度100～500μg/mL，如100、250、500μg/mL，係具有抑制腫瘤細胞生長之能力，並且又以於濃度為250、500μg/mL時，具有促使G0/G1 細胞週期停滯之能力。 換言之，本發明所揭抹草萃取物於濃度100～500μg/mL具有良好抑制腫瘤細胞生長之能力，而能達到治療或延緩乳癌之功效，其中抹草萃取物之濃度為250μg/mL，其係為抑制腫瘤細胞生長之最低濃度。
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如請求項21之裝置，其中該圓柱體具有相對於該手柄之延伸部份之近端及遠端，且其中該圓柱體包含位於該近端之凸緣，該凸緣係經組態以使過濾器在該凸緣與該海綿容器之間固定於其上，從而使該過濾器之薄膜置於該海綿容器之遠端。 如請求項18之裝置，其中該玻片固持器組件包含複數個可彼此移動連接之定位構件，該玻片固持器可移動連接至該等定位構件中之一者以使固定於該玻片固持器上之玻片可與固定於該過濾器固持器組件上之過濾器進行滾動接觸。 如請求項4之裝置，其中該圓柱體具有相對於該手柄之延伸部份之近端及遠端，且其中該圓柱體包含位於該近端之凸緣，該凸緣係經組態以使過濾器在該凸緣與該海綿容器之間固定於其上，從而使該過濾器之薄膜置於該海綿容器之遠端。 如圖2中所示，在將過濾器30(將所關注之顆粒收集在其薄膜28上)置於過濾器固持器組件14上之後，使第二定位構件32圍繞第一鉸鏈18旋轉至第二位置，以使玻片56到達接近薄膜28之位置。 因為玻片固持器33及玻片56之大部份重量離第一鉸鏈18最遠且插銷38離第一鉸鏈18較近，所以重力將使離第一鉸鏈18最遠之玻片固持器33之一側落下並使玻片固持器33之另一側升起。 因為樞軸銷38a比頂舉銷 38b更靠近第一鉸鏈18，所以其等比頂舉銷38b上升更多，從而將玻片56依稍偏離水平面之斜角方向置於薄膜28之外緣40下以用於初始接觸。
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在步驟112中，自該樣品小瓶移出過濾器30之薄膜28，然後再封蓋。 在一該實施例中，過濾器固持器組件較佳在與該把手部份自該延伸部份延伸之方向大約相同的方向上自該手柄之延伸部份延伸。 在一該實施例中，該過濾器固持器組件之中心軸具有相對於該延伸部份之近端及遠端，且包括在近端處之軸肩及在遠端處之海綿容器。
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將控制真空施加至該樣品收集器，以通過其篩網過濾器抽吸流體，直至緊靠該過濾器收集到所需數量及空間分佈之細胞。 此後，自該樣品容器移出該樣品收集器，並將過濾器部份按壓在載玻片上，以將所關注之顆粒以實質上與收集時相同之空間分佈轉移至該玻片上。 某些用於在玻片上產生有利於目視檢查之薄單層細胞的方法及裝置係揭示於美國專利案第5,143,627、5,240,606、5,269,918、5,282,978、6,572,824、6,562,299及7,579,190號中。 依據申請專利範圍第1或2項所述用途，其中，該抹草萃取物係能夠抑制下列至少一蛋白表現：cyclinD1、cyclinE、E2F、cdk2、cdk4、p-Rb/Rb、Bcl-2。 將MCF-7 細胞分別以濃度：0、100、250μg/mL之抹草萃取物處理24小時，並於24小時時間點收集細胞裂解液。
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由第五圖至第七圖之結果可知，本發明所揭抹草萃取物係能夠有效地抑制腫瘤細胞生長，並使腫瘤細胞走向凋亡，而能夠達到治療乳癌及增加預後之功效。 由第四圖之結果可知第二裸鼠腫瘤組織中的血紅素濃度較第一組裸鼠降低70％，並且，相較於第三組裸鼠來說，亦降低29％。 由此結果可推知本發明所揭抹草萃取物係具有阻斷腫瘤血管新生之能力，而能夠達到減緩乳癌惡化或是避免乳癌復發之功效。 根據衛生福利部資料顯示，乳癌發生率在臺灣逐年上升，為女性癌症死亡的第二大原因，且為西方國家女性普遍的疾病之一。 乳癌通常發生在乳房腺上皮組織，當乳腺細胞發生病變並變成腫瘤時，即屬於乳腺癌，而乳癌的特徵包括乳房腫塊或形狀改變、乳頭分泌物、皮膚凹陷、皮膚出現紅色鱗屑狀斑塊等。 基於乳房含有豐富的血管、淋巴，所以乳癌容易擴散到其他器官，造成癌症快速惡化，因此，早期發現乳癌之病徵對於乳癌之治療及預後是非常重要的。
性行為時的強力擠壓或激烈運動造成的乳房晃動都會刺激分泌物出現。 依據申請專利範圍第1或2項所述用途，其中，該抹草萃取物係能夠提升下列至少一蛋白表現：cleaved-casepase 3、CAD。 請再參閱第十圖，以每分鐘斑馬魚之心跳數與DCE 濃度0 g/mL 相比作為心跳異常率，可知心跳異常率於抹草萃取物濃度0~1000 g/mL間呈鐘型曲線分布，並於濃度200 g/mL時，雖然心跳異常率為45％，但其相對致死率為低。
在該實施例中，該過濾器固持器組件在與該把手部份自該延伸部份延伸之方向大約相同的方向上自該手柄之延伸部份延伸。 第六圖係為分析各組裸鼠腫瘤組織中細胞增生蛋白PCNA表現量之結果。 第七圖係為分析各組裸鼠腫瘤組織中促凋亡蛋白（apoptotic body）表現量之結果。 第八圖係為檢測與細胞週期分子相關蛋白之表現及將之進行統計分析之結果。
乳頭分泌物: 乳頭出現分泌物，到底正不正常？醫師教妳察顏觀色！
假使分泌物的顏色為血色、太過透明、咖啡色、或黃綠色，通常是警訊！ 假使配合上量多，還僅在單邊、甚至單孔出現，最好要趕快就醫檢查。 剛停餵母乳沒多久（兩至三年以內）的女性也還會存有一些乳房分泌物，若量太多、或容易造成乳房痛或發炎，就要就醫檢查。 乳汁不是僅在產後出現，其實懷孕二十幾周時就可能出現乳汁，所以在孕期若看見乳頭出現些微白白的分泌物，先不用太過緊張而急著跑醫院，於產檢追蹤時向醫師確認一下即可。 依據申請專利範圍第1或2項所述用途，其中，該抹草萃取物係取一抹草以水作為萃取溶劑，並於高溫下進行萃取後，將所得濾液進行乾燥而得者。
乳頭分泌物: 乳頭出現分泌物，到底正不正常？（懶人包）
過濾器固持器組件14在與該玻片固持器組件相隔之位置附接至手柄12之延伸部份62。 參考圖1及5，該過濾器固持器組件14包含開放式中心軸42，通過該開放式中心軸可對薄膜28施加真空。 過濾器固持器組件14亦包含圍繞該中心軸42放置之往復圓柱體44及兩個圍繞該圓柱體44放置之O形環46。 乳頭分泌物 乳頭分泌物 該圓柱體44包含經組態以與固定於該圓柱體44上的過濾器30相配之凸緣66。 該圓柱體44、凸緣66、及O形環46以摩擦或壓縮配合方式將過濾器30固定於過濾器固持器組件14上。