單環環烷基的非限定性實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環己二烯基、環庚基、環庚三烯基、環辛基等。 環烷基可以是任選取代的或 未取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、側氧基、胺基、鹵烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。 將4-戊炔-1-醇(8.4g，0.1mol)和三乙胺(15.2g，0.15mol)溶解於100ml二氯甲烷中，降溫0-5℃，滴加甲磺醯氯(12.6g，0.11mol)，控制溫度小於5℃。 TLC檢測反應完成，將反應液倒入200ml飽和氯化銨水溶液中，二氯甲烷萃取100ml×2，有機相用飽和食鹽水100ml×2洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得14.2g油狀產物。
將2-(2,6-二側氧-哌啶-3-基)-4-氟-異吲哚-1,3-二酮(4.8g，17.6mmol)溶解於40ml DMF中，室溫加入碳酸銫(8.6g，26.4mmol)和催化量碘化鉀，加畢，將反應體系降溫至0-5℃。 慢慢滴加83a(4.6g，17.6mmol，實施例75中製備)的12mlDMF溶液，加畢緩慢升溫室溫反應過夜。 TLC檢測反應完成，將反應液倒入150ml水中，乙酸乙酯萃取80ml×2萃取，合併有機相用飽和食鹽水洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到5.3g黃色固體狀產物。 將3-[4-(第三丁基-二甲基-甲矽烷氧基)-1-側氧-1,3-二氫-異吲哚-2-基]-哌啶-2,6-二酮(1g，2.67mmol)溶解於15ml四氫呋喃中，降溫0℃至5℃，滴加四丁基氟化銨四氫呋喃溶液(1M，5ml)，滴畢，緩慢升溫室溫反應2小時。 TLC檢測反應完成，將反應液倒入80ml飽和食鹽水中，乙酸乙酯50ml×2 萃取，有機相用飽和食鹽水洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得583mg固體狀產物。
R5和R6與其連接的氮原子一起形成含氮雜環基，較佳5-7員含氮雜環基，該含氮雜環基任選進一步被選自鹵素、C1-C6烷基、C3-C7環烷基、5-7員雜環基的一個或多個基團取代。 於室溫，將N-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽(14.8g，0.08mol)和水合肼(20g，0.4mol)溶解於乙醇中，將反應體系加熱至90℃反應4小時。 TLC檢測反應完全，減壓濃縮，殘餘物加入100ml水再次減壓濃縮(重複三次)得粗品(2-嗎啉-4-基-乙基)-肼。 “取代的”指基團中的一個或多個氫原子，較佳為最多5個，更佳為1~3個氫原子彼此獨立地被相應數目的取代基取代。 不言而喻，取代基僅處在它們的可能的化學位置，所屬技術領域具有通常知識者能夠在不付出過多努力的情況下確定(藉由實驗或理論)可能或不可能的取代。
烷基的非限定性實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基、正戊基、異戊基、 新戊基、己基、異己基、正庚基、異庚基、正辛基、異辛基、正壬基、正癸基等。 烷基可以是取代的或未取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、側氧基、胺基、鹵烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。 將化合物80(480mg，0.503mmol)溶解於4ml二氯甲烷中，將反應體系降溫到0-5℃，加入4ml三氟乙酸，加畢升溫至室溫反應2小時。 TLC檢測反應完成，將反應液減壓濃縮，殘餘物加入10ml乙酸乙酯打漿1小時，過濾，固體鼓風乾燥(60℃)4小時，得358mg固體狀產物。 與實施例74步驟2-步驟3的製備方法相同，除了用磷酸二-第三丁基酯氯甲基酯代替實施例74步驟2中的74a，得到磷酸二-第三丁基酯((3-(4-(5-((1-(4-(3-(5-(第三丁基)異噁唑-3-基)脲基)苯基)-1H-苯并咪唑-5-基)氧基)戊醯胺基)-1-側氧異吲哚-2-基)-2,6-二側氧哌啶-1-基)甲基)酯。 與實施例74步驟2-步驟3的製備方法相同，除了用-2-第三丁氧羰基胺基-3-甲基丁酸氯甲基酯代替實施例74步驟2中的74a，得到(第三丁氧羰基)-L-纈胺酸(3-(4-(5-((1-(4-(3-(5-(第三丁基)異噁唑-3-基)脲基)苯基)-1H-苯并咪唑-5-基)氧基)戊醯胺基)-1-側氧異吲哚-2-基)-2,6-二側氧哌啶-1-基)甲基酯。
E3泛素連接酶(在人類中已知有600多種)賦予泛素化底物特異性，由於其對某些蛋白質底物的特異性，其較一般的蛋白酶更具吸引力。 E3泛素連接酶的配體的開發已被證明具有挑戰性，部分原因是它們必須破壞蛋白質與蛋白質的相互作用。
烷氧基可以是任選取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、羧基、或羧酸酯基。 化療方法 化療方法 化療方法 將[2-(2,6-二側氧哌啶-3-基)-1-側氧-2,3-二氫-1H-異吲哚-4-基氧基]-乙酸第三丁酯(135mg，0.361mmol)溶解於10ml二氯甲烷中，於室溫加入5ml三氟乙酸，加畢，繼續室溫反應2小時。 TLC檢測反應完成，將反應液直接濃縮得150mg粗品，無需純化，直接用於下一步反應。 與實施例2的製備方法相同，除了用化合物代替實施例2中的化合物，得到1–乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基-3-(5-第三丁基-2H-吡唑-3-基)-脲。 與實施例17的製備方法相同，除了用五甘醇代替步驟1中的二甘醇，得到1-(5-第三丁基-2H-吡唑-3-基)-3-(4–乙氧基)-乙氧基]-乙氧基-乙氧基)-乙氧基]-苯并咪唑-1-基-苯基)-脲。
將反應液倒入500ml飽和食鹽水中，水相用二氯甲烷200ml×2萃取，合併有機相用飽和食鹽水洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到190g淡黃色油狀粗品產物。 與實施例74步驟3的製備方法相同，除了用82a(實施例61中製備)代替實施例74步驟3中的74c，得到[1,4′-聯哌啶]-1′-羧酸(3-(4-(5-((1-(4-(3-(3-(第三丁基)-1H-吡唑-5-基)脲基)苯基)-1H-苯并咪唑-5-基)氧基)戊醯胺基)-1-側氧異吲哚-2-基)-2,6-二側氧哌啶-1-基)甲基酯。 將步驟1得到的3-(4-硝基-1-側氧-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-2,6-二側氧-哌啶-1-甲酸第三丁酯(2.2g，5.65mmol)溶解於50ml四氫呋喃中，室溫加入300mg濕鈀碳，氫氣置換3次，室溫反應16小時。 TLC檢測反應完成，過濾，於20mL二氧六環中室溫攪拌，室溫加入DMAP(421mg，0.5eq)，加畢，濾液減壓濃縮得2.0g粗品，無需純化，直接用於下一步反應。
例如，具有游離氫的胺基或羥基與具有不飽和(如烯屬)鍵的碳原子結合時可能是不穩定的。 除非另有規定，本文使用的所有技術和科學術語具有與所屬技術領域具有通常知識者的通常理解相同含義。 在本文的描述中，如果化學結構和化學名稱彼此矛盾時，則是以其化學結構為准。 當在本文使用時，對於任何保護基團、胺基酸和其他化合物的縮寫，除非另有說明，以其常用的公認縮寫表示，或根據IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature表示(參見Biochem.1972,77： )。 R5和R6與其連接的氮原子一起形成含氮雜環基，較佳5-7員含氮雜環基，該雜環基任選進一步被選自鹵素、C1-C6烷基、C3-C7環烷基、5-7員雜環基的一個或多個基團取代。 Rb選自氫、鹵素、胺基、硝基、氰基、羥基、巰基、C1-C6烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵烷氧基和C3-C7環烷基；較佳氫和鹵素。
二價雜環基是指如上定義的雜環基，其具有2個從母環上的相同原子或兩個不同的原子上除去兩個氫原子所衍生的殘基。 二價環烷基是指如上定義的環烷基，其具有2個從母環上的相同原子或兩個不同的原子上除去兩個氫原子所衍生的殘基。 該環烷基環可以稠合於芳基、雜芳基或雜環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為環烷基，非限制性實例包括茚滿基、四氫萘基、苯并環庚烷基等。
冰浴降溫至0℃，緩慢滴入氯硫酸氯甲酯(2.0g，9.2mmol)，升至室溫，攪拌2小時。 有機相用飽和食鹽水100ml×2洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮。 將化合物14b(989mg，4.52mol)溶解於10ml二氯甲烷中，加入三乙胺(685mg，6.78mol)，降溫至小於-5℃，緩慢滴入用5ml二氯甲烷稀釋的甲磺醯氯(620mg，5.4mmol)，保持溫度小於-5℃，3分鐘後滴畢，保持溫度攪拌1小時。 將反應液倒入50ml飽和食鹽水中，滴入乙酸(1.4當量)，用二氯甲烷50ml×2萃取，有機相用飽和食鹽水洗滌兩次，飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到1.15g產物。 將化合物11b(3.5g，7.97mmol)溶解於30ml DMF中，加入疊氮化鈉(1.0g，15.40mmol)，於65℃攪拌2小時。 將反應液倒入100ml飽和食鹽水中，用乙酸乙酯100ml×2萃取，有機相用飽和食鹽水洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到3g固體產物。
將4-(2-羥乙基)哌嗪-1-羧酸第三丁基酯(1.63g，7.08mmol)溶解於20ml二氯甲烷中，於室溫加入三乙胺(1.07g，10.62mmol)，降溫至0℃至5℃，緩慢滴入甲磺醯氯(890mg，7.79mmol)，滴加完畢後，移走冰鹽浴，慢慢升溫至室溫攪拌16小時。 TLC檢測反應完成，將反應液倒入100ml飽和氯化銨水溶液中，二氯甲烷50ml×2萃取，有機相用飽和食鹽水150ml×2洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到2g粗品產物。 將1-(4-胺基-苯基)-1H-苯并咪唑-5-醇(10.00g，44mmol)溶解於90ml DMF中，加入甲磺酸戊-4-炔-1-基酯(8.6g，53mmol)、碳酸鉀(18.4g，133mmol)和催化量碘化鉀，升溫至100℃，攪拌6h。 TLC檢測反應完成，將反應液降至室溫，然後倒入400ml水中，用乙酸乙酯150ml×2萃取。 有機相用飽和食鹽水100ml×2洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到16g油狀產物。 將BOC-L-纈胺酸(3.0g，10.9mmol)、碳酸氫鈉(4.6g，54.7mmol)和四丁基硫酸氫銨(470mg，1.38mmol)溶解於30ml二氯甲烷和30ml的水中，於室溫攪5min。
- 將[1-(4-胺基-苯基)-1H-苯并咪唑-5-基氧基]-乙酸第三丁酯(910mg，2.67mmol)溶解於90mlDMF中，然後加入吡啶(633mg，8.01mmol)，冰鹽浴降溫至-5℃-0℃。
- 泛素化是一個三酶級聯反應，即，需要有由三個酶催化的一系列反應的發生，整個過程也被稱為泛素化信號通路。
- 將氯甲酸苯酯(3.64g，23.25mmol)(用10ml四氫呋喃稀釋)慢慢滴加到上述溶液中，過程中控制溫度在-5℃-0℃。
- 將氯甲酸苯酯(524mg，3.34mmol)慢慢滴加到上述溶液中，過程中控制溫度在-5℃-0℃。
泛素化是指泛素分子在一系列特殊的酶作用下，將細胞內的蛋白質分類，從中選出靶蛋白分子，對靶蛋白進行特異性修飾的過程，形成靶蛋白多聚泛素鏈。 泛素化是一個三酶級聯反應，即，需要有由三個酶催化的一系列反應的發生，整個過程也被稱為泛素化信號通路。 蛋白質泛素化是生物體內一種常見的翻譯後修飾，參與細胞週期、增殖、凋亡、分化、轉移等幾乎一切生命活動的調控。
表3結果顯示本發明化合物能夠抑制FLT3-ITD表達陽性MV4：11和MOLM-13細胞系的生長(誘導細胞凋亡)，其IC50濃度值可達次奈莫耳。 本發明化合物與對照化合物(見表2)用DMSO溶解，化合物純度達98%以上。 細胞培養基分別選用RPMI1640、IMDM，加入5-20%胎牛血清，100U/mL青黴素和100μg/mL鏈黴素，2mM穀胺醯胺或者1mM丙酮酸鈉。 所用細胞系名稱、種類、主要基因特徵、培養基和細胞來源見下表1，其中“amp”為基因擴增；“+++”為基因過/高表達。
與實施例5的製備方法相同，除了用3-胺基-5-第三丁基異噁唑代替步驟10中的5-第三丁基-2H-吡唑-3-基胺，得到1-(5-第三丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-乙氧基)乙氧基]乙氧基苯并咪唑-1-基)苯基]脲。 與實施例4的製備方法相同，除了用3-胺基-5-第三丁基異噁唑代替步驟10中的5-第三丁基-2H-吡唑-3-基胺，得到1-(5-第三丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-乙氧基)乙氧基]苯并咪唑-1-基-苯基)-脲。 與實施例1的製備方法相同，除了用3-胺基-5-第三丁基異噁唑代替步驟10中的5-第三丁基-2H-吡唑-3-基胺，得到1-(5-第三丁基-異噁唑-3-基)-3-乙氧基)苯并咪唑-1-基]-苯基-脲。 與實施例1的製備方法相同，除了用乙醇胺代替步驟2中的2-(2-胺基-乙氧基)-乙醇，並用3-胺基-5-第三丁基異噁唑代替步驟10中的5-第三丁基 -2H-吡唑-3-基胺，得到1-(5-第三丁基-噁唑-2-基)-3-[4-(5-苯并咪唑-1-基)苯基]-脲。 與實施例1的製備方法相同，除了用1-胺基-3,6,9-三氧雜-11-十一醇代替步驟2中的2-(2-胺基-乙氧基)-乙醇，得到1-(5-第三丁基-2H-吡唑-3-基)-3-[4-(5-乙氧基)乙氧基]-乙氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。
與實施例39的製備方法相同，除了用氯甲基碳酸異丙酯代替實施例39步驟1中苯甲酸氯甲酯，得到碳酸3-(4–1,3-二側氧-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-2,6-二側氧哌啶-1-基甲基酯異丙基酯。 與實施例39的製備方法相同，除了用辛酸氯甲酯代替實施例39步驟1中苯甲酸氯甲酯，得到辛酸3-(4–1,3-二側氧-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-2,6-二側氧-哌啶-1-基甲基酯。 與實施例39的製備方法相同，除了用丁酸氯甲酯代替實施例39步驟1中苯甲酸氯甲酯，得到丁酸3-(4–1,3-二側氧-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-2,6-二側氧-哌啶-1-基甲基酯。 與實施例39的製備方法相同，除了用異丁酸氯甲基酯代替實施例39步驟1中苯甲酸氯甲酯，得到異丁酸3-(4–1,3-二側氧-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-2,6-二側氧-哌啶-1-基甲基酯。 將3-溴-2-溴甲基-苯甲酸甲酯(2g，6.51mmol)、3-胺基-2,6-哌啶二酮鹽酸鹽(1.1g，6.51mol)和三乙胺(2g，19.8mmol)溶解於30ml DMF中，外浴70℃反應15小時。 TLC檢測反應完成，降溫至室溫，將反應液倒入150ml水中，抽濾，固體水洗，鼓風乾燥(60℃)8小時，得1.8g灰色固體。
伸烷基的非限制性實例包括但不限於亞甲基(-CH2-)、1,1-伸乙基(-CH-)、1,2-伸乙基(-CH2CH2)-、1,1-伸丙基(-CH-)、1,2-伸丙基(-CH2CH-)、1,3-伸丙基(-CH2CH2CH2-)、1,4-伸丁基(-CH2CH2CH2CH2-)和1,5-伸丁基(-CH2CH2CH2CH2CH2-)等。 J1和J2各自獨立地選自鹵素、羥基、胺基、炔基和羧基；Y、U、Y1、Y2、Y3、Y4、A、E、L、R1、R2如通式中所定義。 “任選”或“任選地”意味著隨後所描述的事件或環境可以但不必發生，該說明包括該事件或環境發生或不發生的場合。 例如，“任選被烷基取代的雜環基團”意味著烷基可以但不必須存在，該說明包括雜環基團被烷基取代的情形和雜環基團不被烷基取代的情形。
酸可以為無機酸，包括但不限於：鹽酸、硫酸、磷酸、氫溴酸；或可以為有機酸，包括但不限於：檸檬酸、馬來酸、草酸，甲酸、乙酸、丙酸、戊酸、乙醇酸、苯甲酸、富馬酸、三氟乙酸、琥珀酸、酒石酸、乳酸、谷胺酸、 天門冬胺酸、水楊酸、丙酮酸、甲磺酸、苯磺酸、對苯磺酸。 術語“鹵烷基”指其中一個或多個氫原子被鹵素取代的烷基，其中烷基的定義如上所述。 非限定性實例包括氯甲基、三氟甲基、1-氯-2-氟乙基、 2,2-二氟乙基、2-氟丙基、2-氟丙-2-基、2,2,2-三氟乙基、1,1-二氟乙基、1,3-二氟-2-甲基丙基、2,2-二氟環丙基、(三氟甲基)環丙基、4,4-二氟環己基和2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基。 術語“伸烷基”指包括1至20個碳原子的飽和直鏈或支鏈脂肪族烴基團，其具有2個從母體烷的相同碳原子或兩個不同的碳原子上除去兩個氫原子所衍生的殘基，較佳含有1至12個碳原子，更佳含有1至6個碳原子。
於室溫，將步驟1中得到的(2-嗎啉-4-基-乙基)-肼(0.08mol)和氰基頻那酮(10g，0.08mol)溶解於200ml乙醇中，加入0.2ml濃鹽酸，將反應體系加熱至90℃反應12小時。 TLC檢測反應完全，減壓濃縮，殘餘物藉由管柱層析色譜法(沖提劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得到8g粗品。 所得粗品於40ml甲基第三丁基醚中攪拌4小時，過濾，固體少量甲基第三丁基醚洗滌，鼓風乾燥(60℃)1小時，得3g白色固體狀的5-第三丁基-2-(2-嗎啉-4-基-乙基)-2H-吡唑-3-基胺。 將2-(2,6-二側氧哌啶-3-基)-4-氟-異吲哚-1,3-二酮(1.54g，5.598mmol)溶解於20mlDMF中，加入碳酸銫(3.65g，11.964mmol)和催化量碘化鉀，降溫至0℃至5℃，緩慢滴入[1,4′]雙哌啶基-1′-羧酸氯甲酯(1.75g，6.718mmol)，滴加完畢後，移走冰鹽浴，慢慢升溫至室溫攪拌1小時。
細胞主要基因特徵分別來源於COSMIC Cell Lines Project和相關研究論文。 本發明的已知起始原料可以採用或按照本領域已知的方法來合成，或購買自上海達瑞精細化學品有限公司、上海泰坦科技股份有限公司、上海潤捷化學試劑有限公司、TCI、Aldrich Chemical Company。 實施例中未註明具體條件的實驗方法，通常按照常規條件，或按照原料或商品製造廠商所建議的條件。
將步驟2得到的4-(5-胺基-3-第三丁基-吡唑-1-基)-哌啶-1-羧酸第三丁酯(210mg，0.652mmol)溶解於乙酸乙酯中。 於室溫加入氫氧化鈉(65mg，1.63mmol，溶於2ml水中)，然後滴加氯甲酸-2,2,2-三氯乙酯(207mg，0.978mmol)，滴畢繼續室溫反應30分鐘。 TLC檢測反應完全後，將反應液倒入水中，用乙酸乙酯萃取(50ml×3)，有機相用飽和NaCl溶液洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到350mg油狀的4-[3-第三丁基-5-(2,2,2-三氯-乙氧基羰基胺基)-吡唑-1-基]-哌啶-1-羧酸第三丁酯。
將步驟1得到的(190mg，0.281mmol)溶解於二氯甲烷中，室溫加入三氟乙酸，加畢室溫反應1小時。 TLC檢測反應完全後，將反應液減壓濃縮，殘餘物加入100ml水溶解，胺水調節pH為8-9，用二氯甲烷50ml×2萃取。 化療方法 有機相用飽和食鹽水100ml×2洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到60mg黃色固體狀產物。
直到2017年以後才有幾個靶向小分子藥物獲批應用於臨床實踐，但其長期臨床效果有待進一步的臨床驗證。 如請求項20所述的用途，其中如請求項1至16中任一項所述的通式所示的化合物或其內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其前藥、或其藥學上可接受的鹽或者如請求項18所述的醫藥組成物可以與另外一種或多種藥物如癌症治療藥物或者治療方法如癌症治療方法同時、分別或相繼組合使用。 如表8結果顯示，本發明化合物能夠有效的誘導MV4：11和MOLM-13細胞中表達的FLT3-ITD蛋白的降解。 細胞培養：人白血病MOLM-13細胞株懸浮培養，培養條件為RPMI 1640培養基中加10%胎牛血清、100U/mL青黴素和100μg/mL鏈黴素，37ºC 化療方法 5%CO2孵箱培養。 當細胞飽和度為80%~90%，數量到達要求時，收取細胞，計數，接種。 細胞培養：人白血病MV4：11(ATCC-CRL95918)細胞株懸浮培養，培養條件為RPMI 1640培養基中加10%胎牛血清，100U/mL青黴素和100μg/mL鏈黴素，37ºC 5%CO2孵箱培養。
將反應液倒入100ml水中，用乙酸乙酯150ml萃取，有機相用飽和食鹽水150ml×2洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到1g粗品產物。 將2-(2,6-二側氧哌啶-3-基)-4-氟-異吲哚-1,3-二酮(1.38g，5mmol)溶解於20ml DMF中，加入碳酸銫(3.26g，10mmol)和催化量碘化鉀，降溫至0℃至5℃，緩慢滴入苯甲酸氯甲酯(1.02g，6mmol)滴加完畢後，移走冰鹽浴，慢慢升溫至室溫攪拌1小時。 將反應液倒入100ml水中，用乙酸乙酯150ml萃取，有機相用飽和食鹽水150ml×2洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到2g粗品產物。 於90℃，將2-(2,6-二側氧哌啶-3-基)-4-氟-異吲哚-1,3-二酮(8.0g，28.98mmol)、2-(2-胺基乙氧基)-乙醇(3g，28.57mmol)和三乙胺(3.5g，34.65mmol)在35ml DMSO中攪拌1小時。 將反應液降溫至室溫，將反應液倒入250ml飽和食鹽水中，用HCl調PH為5~6，水相用乙酸乙酯80ml×2萃取，合併有機相用飽和食鹽水洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到，5g粗品產物。