相对于健康志愿者，分别有5种和7种凝集素识别的糖链在SCLC-LS和SCLC-ES患者血清中差异表达；相对于肺部良性病变患者，分别有9种和7种凝集素识别的糖链在SCLC-LS和SCLC-ES患者血清中差异表达。 (表3和图2)其中多数属于甘露糖型的糖链、唾液酸化的糖链和半乳糖型的糖链，说明甘露糖型的糖链、唾液酸化的糖链和半乳糖型的糖链在小细胞肺癌发生发展过程中，其表达发生着显著的变化。 相对于健康志愿者，分别有11种和13种凝集素识别的糖链在SCC-ES和SCC-AS患者血清中差异表达；相对于肺部良性病变患者，分别有9种和11种凝集素识别的糖链在SCC-ES和SCC-AS患者血清中差异表达。 (表5和图2)其中多数属于岩藻糖化的糖链、唾液酸化的糖链、半乳糖型糖链和甘露糖型糖链，说明岩藻糖化的糖链、唾液酸化的糖链、半乳糖型糖链和甘露糖型糖链识别的糖结合蛋白在肺鳞癌发生发展过程中，其表达发生着显著的变化。 基于本发明，可以制备凝集素芯片、酶标板等测试载体，快速、有效鉴别肺癌类型(小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌)及其分期，且检测操作简单、成本可控。 针对血清样本，凝集素MAL-I、PTL-II、BPL和MAL-II中任意两种以上的组合在特定凝集素组合在制备用以鉴别肺鳞癌的测试载体方面的用途。
糖基化作为一种重要的翻译后修饰，可以影响蛋白质的溶解度、折叠、定位及构象的维持，调节蛋白质的功能和降解；还可以介导分子与分子之间、分子与细胞之间、细胞与细胞之间的相互作用。 大量研究表明，蛋白质糖基化，作为重要的翻译后修饰，在肿瘤发生、浸润、转移的过程中会发生改变并有相应的功能性作用。 糖基化修饰的改变主要包括两个方面：1)多肽链上糖基化结合位点的改变；2)寡糖链结构的改变。 因此，差异性表达的蛋白质糖基化亚型可以成为新型肿瘤标记物，用于肿瘤的早期诊断，还可以成为肿瘤生物靶向治疗的新靶点。
腺癌早期: CN105628934B – 特定凝集素组合在制备用以鉴别肺癌类型及分期的测试载体方面的用途
研究发现，在肿瘤细胞中，糖基化的加工、合成机制发生了改变，这些改变导致了异常糖基化蛋白质的产生和释放。 虽然，目前糖基化改变对肿瘤的发展关系还没有一个完整的了解，但这些改变对早期诊断或作为预后的指示总是有利无弊的。 现在，已经有一些研究者通过检测这些外周血中的异常糖蛋白亚型，以期寻找到更理想的肿瘤标志物。 虽然，近年来肺癌的治疗方面已取得了长足的进步，但从总体上来说，肺癌的预后情况仍旧很不理想，非小细胞肺癌和小细胞肺癌的5年生存率仅分别为14％和4％。 引起这一情况的主要原因是由于肺癌起病隐匿，早期通常无明显症状，大多数肺癌患者在确诊时已处于进展期，失去了手术治愈的机会。 因此，肺癌的早期筛查和诊断对于提高肺癌患者的生存率、延长患者的生存期，都是至关重要的。
- 使用时, 将制备好的中药液每日一剂，早晚分服，给药量290毫升/次，饭后服，治疗138天，疼痛基本消失。
- 例如，在一个凝集素芯片上固定以上所提到的所有凝集素，则能够一次确定肺癌类型及其分期。
- 凝集素芯片检测样品用量少、高通量、灵敏度极高，并且可以与多种检测手段整合使用，可以快速、准确检测出待测样本中糖蛋白糖链的差异，因而可大大提生物芯片结果检测、分析的速度和效率，是一种新型的快速、高效的鉴别病症的手段。
- 相对于健康志愿者，分别有5种和7种凝集素识别的糖链在SCLC-LS和SCLC-ES患者血清中差异表达；相对于肺部良性病变患者，分别有9种和7种凝集素识别的糖链在SCLC-LS和SCLC-ES患者血清中差异表达。
- 超声清洗15min，无水乙醇清洗三次，每次10min。
- 然后用超纯水清洗四次，每次2min，无水乙醇清洗两次，每次2min。
- 治疗：予以上方药，每日一剂，早晚分服，服药后尿量增多，隐痛、胀痛亦缓，食欲佳，服药137天后，疼痛基本消失，经复查：患者左上腹仍有一边缘不清之肿物，伴有轻度压痛，体重较前增加，能做家务活。
胰腺癌是常见的胰腺肿瘤，是一种恶性程度很高，诊断和治疗都很困难的消化道恶性肿瘤，约90%为起源于腺管上皮的导管腺癌，其发病率和死亡率近年明显上升，5年生存率 腺癌早期 本发明就是针对上述胰腺癌的治疗而提出的一种中草药配方，采用该配方制备的成品药物药效好，疗效显著，毒副作用小，安全性能高，可有效抗转移复发和延长生存期。 37种不同的凝集素对各组血清糖蛋白糖链均有不同程度的识别，说明在鳞癌发生发展的过程中，血清中的糖蛋白糖链均发生了变化。 凝集素芯片是通过固定于芯片上的凝集素探针与样品中糖蛋白糖链特异性结合，可以高通量地检测出样品中糖蛋白糖链结构和连接方式的变化，是研究糖蛋白糖链结构变化最有效的分析工具之一，其有助于发展新的诊断和监测疾病的方法。
腺癌早期: CN104147412A – 一种治疗胰腺癌的内服药物及其制备方法
混合样本经Cy3荧光染料标记后用Sephadex G-25除盐柱去掉游离荧光。 图2为凝集素芯片结果扫描图，具体有健康志愿者，肺部良性病变患者，小细胞肺癌局限期(SCLC-LS)患者，小细胞肺癌广泛期(SCLC-ES)患者，肺鳞癌早期(SCC-ES)患者，肺鳞癌晚期(SCC-AS)患者，肺腺癌早期(ADC-ES)患者及肺腺癌晚期(ADC-AS)患者血清蛋白凝集素芯片荧光检测结果。 1.特定凝集素组合在制备用以鉴别小细胞肺癌的测试载体方面的用途，针对血清样本，其特征在于：所述特定凝集素组合是凝集素GSL-I和SNA的组合。 相对于健康志愿者，分别有16种和16种凝集素识别的糖链在ADC-ES和ADC-AS患者血清中差异表达；相对于肺部良性病变患者，分别有13种和14种凝集素识别的糖链在ADC-ES和ADC-AS患者血清中差异表达。 (表4和图2)其中多数属于岩藻糖化的糖链、唾液酸化的糖链、半乳糖型糖链和甘露糖型糖链，说明岩藻糖化的糖链、唾液酸化的糖链、半乳糖型糖链和甘露糖型糖链识别的糖结合蛋白在肺腺癌发生发展过程中，其表达发生着显著的变化。
使用时, 将制备好的中药液每日一剂，早晚分服，给药量290毫升/次，饭后服，治疗135天，疼痛基本消失。 使用时, 将制备好的中药液每日一剂，早晚分服，给药量290毫升/次，饭后服，治疗132天，疼痛基本消失。 使用时, 将制备好的中药液每日一剂，早晚分服，给药量290毫升/次，饭后服，治疗138天，疼痛基本消失。 使用时, 将制备好的中药液每日一剂，早晚分服，给药量290毫升/次，饭后服，治疗130天，疼痛基本消失。 本发明的目的是提供一种治疗胰腺癌的内服药物及其制备方法，以解决胰腺癌患者不易转移复发和延长生存期的问题。 腺癌早期 该药物是以常见的中草药为原料，具有配伍完善，药力强大、切中病机，充分体现了抗转移复发和延长生存期的治疗原则。
腺癌早期: CN104147412A – 一种治疗胰腺癌的内服药物及其制备方法
所有实验用水都为经Milli-Q50纯水系统(美国Millipore公司)处理的超纯水。 Sephadex G-25柱脱盐购自美国GE Healthcare公司。 37种凝集素(具体名称见表1)分别购自Sigma-Aldrich公司、德国Vector公司。 患病症状：曾患“胃病”，身体进行性消瘦，左上腹饱胀不适，胀痛、食欲不振，于2001年5月经某医院检查后诊断为胰腺癌早期。 患病症状：患者左上腹隐痛，恶心、可触及包块，纳食欲差，进行性消瘦，白色大便，于2002年3月11日经检查后诊断为胰腺癌。 治疗：予以上方药，每日一剂，早晚分服，服药后尿量增多，疼痛减轻，饭量增加，服药120天后，疼痛基本消失，于同年12月31日复查，左上腹仍有一边缘不清之肿物，有轻度压痛，体重较前增加，能做些轻微农活。
本发明通过大量的实验和分析，最终确立了针对血清样本的特定凝集素组合能够快速鉴别血清中糖蛋白糖链的变化，为快速、有效鉴别肺癌种类(小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌)以及分期提供新的检测方案，从而明确了特定凝集素组合在制备用以鉴别肺癌类型及分期的测试载体方面的用途。 本发明涉及一种基于血清糖蛋白糖型利用凝集素鉴别肺癌类型及病期的方案，具体涉及特定凝集素组合在制备用以鉴别肺癌类型及分期的测试载体方面的用途。 本发明明确了针对血清样本，特定凝集素组合在制备用以鉴别肺癌类型的测试载体方面的用途。 其中，凝集素GSL‑I和SNA的组合、凝集素HHL、WFA、WGA、PWM、LEL和MAL‑I中任意两种以上的组合、凝集素MAL‑I、PTL‑II、BPL和MAL‑II中任意两种以上的组合分别对应于小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌的种类鉴别。 本发明还明确了另外的特定凝集素组合在制备用以鉴别相应种类肺癌分期的测试载体方面的用途。 腺癌早期 为了消除个体差异带来的影响并归一化个体样本，本研究中，按照健康志愿者、肺部良性病变、小细胞肺癌局限期、小细胞肺癌广泛期、肺腺癌早期、肺腺癌晚期、肺鳞癌早期和肺鳞癌晚期进行分组，每例样本取10μL进行混合，然后用Brandford法蛋白定量。
腺癌早期: CN105628934B – 特定凝集素组合在制备用以鉴别肺癌类型及分期的测试载体方面的用途
将制备好的凝集素芯片放置于4℃ 干燥器，避光保存，备用。 电热鼓风干燥箱：天津泰斯特公司；高压灭菌锅：日本TOMY公司；超速冷冻离心机5804R：德国Eppendorf公司；微量核酸蛋白测定仪：德国Implen公司；生物芯片扫描仪4000B：美国Axon公司；芯片点样仪：博奥晶芯SmartArrayer48点样仪；芯片杂交箱HL-2000：美国UVP公司。 首先用PBST、PBS各清洗玻片一次，每次5min，离心甩干。 将凝集素芯片与700μl封闭缓冲液在芯片杂交盒中孵育，25℃旋转反应1h。 封闭结束后用PBST、PBS各清洗玻片两次，每次5min，甩干。 用Genepix4000B芯片扫描仪扫描封闭后芯片，检查封闭效果。
- 浸泡入250mL 10％NaOH溶液中，避光，摇床上反应12h后超声15min。
- 再将玻片浸泡到200mL 10％GPTS溶液中，避光，摇床上孵育反应3h，对玻片进行环氧化修饰。
- HV，健康志愿者；BLD，肺部良性病变；ADC-ES，腺癌早期；ADC-AS，腺癌晚期；―，无显著差异。
- 表中数据表示该组的凝集素芯片结果中每个凝集素对应NFI相对于对照组NFI的Fold-change值。
- 患病症状：曾患“胃病”，身体进行性消瘦，左上腹饱胀不适，胀痛、食欲不振，于2001年5月经某医院检查后诊断为胰腺癌早期。
一种治疗胰腺癌的内服药物及其制备方法，所述药物的各个组分及其质量份比为：佛甲草、象牙、荠菜、金银花、吉祥草、车前草、鱼腥草和淡竹叶各1-3份。 表中数据表示该组的凝集素芯片结果中每个凝集素对应NFI相对于对照组NFI的Fold-change值。 HV，健康志愿者；BLD，肺部良性病变；ADC-ES，腺癌早期；ADC-AS，腺癌晚期；―，无显著差异。 腺癌早期 糖基化是最普遍的蛋白质翻译后修饰之一，研究发现约一半以上的哺乳动物蛋白质都发生了糖基化。
腺癌早期: CN104147412A – 一种治疗胰腺癌的内服药物及其制备方法
其中，腺癌发病率最高，约占肺癌的50％；鳞癌，曾经最为常见 的肺癌类型，现约占肺癌的1/3。 患病症状：左上腹部隐痛、胀痛、恶心、纳食不佳，身体消瘦，可触及包块，大便稍白，经某县医院检查后，诊断为早期胰腺癌。 B、将粉碎好的药物盛装到布袋内扎口，同时将盛满药物的布袋放入冷开水中浸泡半小时后，再将浸泡好的药物和浸泡液一并放入到煎药机内，注入适量的冷开水，先武火烧沸后，改文火煎制50分钟，煎制两次，合并中药液580毫升即可。 使用Genepix4000B芯片扫描仪扫描芯片，GenePix3.0软件从芯片扫描结果图圈点分析后，导出GPR文件，根据其中的数据信息进行分析。
针对血清样本，凝集素HHL、WFA、WGA、PWM、LEL和MAL-I中任意两种以上的组合在制备用以鉴别肺腺癌的测试载体方面的用途。 基于以上方案，还可以以上述特定凝集素组合为单元再进行组合，制备包含凝集素种类更多的测试载体。 腺癌早期 例如，在一个凝集素芯片上固定以上所提到的所有凝集素，则能够一次确定肺癌类型及其分期。 一种治疗胰腺癌的内服药物及其制备方法，其特征在于，所述服用方法为：将制备好的中药液每日一剂，早晚分服，给药量290毫升/次，饭后服。 本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种治疗胰腺癌的内服药物，特别是供胰腺癌患者使用的内服药物及其制备方法的领域。
腺癌早期: CN105628934B – 特定凝集素组合在制备用以鉴别肺癌类型及分期的测试载体方面的用途
浸泡入250mL 10％NaOH溶液中，避光，摇床上反应12h后超声15min。 然后用超纯水清洗四次，每次2min，无水乙醇清洗两次，每次2min。 再将玻片浸泡到200mL 10％GPTS溶液中，避光，摇床上孵育反应3h，对玻片进行环氧化修饰。 超声清洗15min，无水乙醇清洗三次，每次10min。 原发性支气管肺癌，简称肺癌，是起源于支气管粘膜或腺体的恶性肿瘤。
治疗：予以上方药，每日一剂，早晚分服，治疗30天后复查，症状减轻，尿量增多，嘱续服130天后，疼痛基本消失，于同年9月14日复查，症状基本消失，体重明显增加，追访半年仍还健在。 患病症状：患者曾有“胃病史”，进行性消瘦，左上腹饱胀不适，胀痛、恶心、食欲不振，于2001年5月经某医院检查后诊断为胰腺癌早期。 甘氨酸，磷酸氢二钠，磷酸二氢钠，吐温-20和蛋白酶抑制剂均购自美国Sigma-Aldrich公司。 其他化学试剂均为分析纯级别，在使用前没有经过进一步纯化。
腺癌早期: CN105628934B – 特定凝集素组合在制备用以鉴别肺癌类型及分期的测试载体方面的用途
HV，健康志愿者；BLD，肺部良性病变；SCC-ES，鳞癌早期；SCC-AS，鳞癌晚期；―，无显著差异。 生物芯片现已成为快速、高效、高通量取得相关信息的重要手段。 随着糖生物学及糖组学研究的进展，糖芯片正发展成为糖生物学及糖组学新兴的检测工具。 凝集素芯片检测样品用量少、高通量、灵敏度极高，并且可以与多种检测手段整合使用，可以快速、准确检测出待测样本中糖蛋白糖链的差异，因而可大大提生物芯片结果检测、分析的速度和效率，是一种新型的快速、高效的鉴别病症的手段。 37种不同的凝集素对各组血清糖蛋白糖链均有不同程度的识别，说明在腺癌发生发展的过程中，血清中的糖蛋白糖链均发生了变化。
患病症状：患者曾有“胃病史”，进行性消瘦，于2005年5月12日入院治疗，经检查：左上腹可触及3.5×5㎝肿物，质硬，表面光滑，有轻度压痛，胃肠透视：胃体部小弯侧有从右向左压迫的占位性病变，同年6月28日剖腹探查，发现胰体部有5×5㎝肿物，并与周围组织粘连，无法切除，其后情况进一步恶化而出院。 将荧光标记的血清蛋白5μg与孵育缓冲液混匀(比例约1：9)，并在盖玻片均匀加入700μl，盖上封闭后的凝集素芯片，于芯片杂交仪中25℃避光旋转孵育3h。 孵育结束后用PBST、PBS各清洗玻片两次，每次5min，离心甩干。 合成Fe3O4磁性微粒，然后用硅烷化试剂修饰磁性微粒制备得到环氧化磁性微粒。 合成的环氧化磁性微粒被应用于凝集素等蛋白的固定化。 根据肺癌的分化程度、形态特征和生物学特点，目前将大多数肺癌分成两大类：非小细胞肺癌(Non-Small-Cell Lung Cancer，NSCLC)和小细胞肺癌(Small-Cell LungCancer，SCLC)。
腺癌早期: CN104147412A – 一种治疗胰腺癌的内服药物及其制备方法
原始数据中小于两倍背景标准偏差的值去掉，每张芯片上每个样本九个重复点的有效值再取平均值，每组平均值表示为组内每个样本平均值的均值±标准偏差。 设计凝集素芯片矩阵(图1)，选用1mg/mL BSA作阴性质控，Cy3荧光染料标记的BSA作位置标记，与37种凝集素共同构成12×10矩阵，每种凝集素重复点样3次，每张芯片上重复4个矩阵。 在384孔板中按矩阵设计顺序依次加入配制好的点样液，使用博奥晶芯48点样仪的针点系统，在环氧修饰片基上点制芯片。 在室温且湿度为55％～65％的环境中孵育6h后，37℃真空干燥芯片，使凝集素固定于芯片上。
腺癌早期: CN105628934B – 特定凝集素组合在制备用以鉴别肺癌类型及分期的测试载体方面的用途
目前在全世界范围内因恶性肿瘤引起的死亡中，肺癌最为常见。 而且，它的发生率正在以约5％的速度逐年增加，预计到2020年，因肺癌而死亡的人数将达到恶性肿瘤引起的总死亡人数的50％。
腺癌早期: CN104147412A – 一种治疗胰腺癌的内服药物及其制备方法
治疗：予以上方药，每日一剂，早晚分服，治疗60天后复查，症状渐减，治疗80天，诸症显著改善，治疗138天，症状基本消失，于同年7月再次复查，显示病变未继续发展。 服用时，首先将制备好的成品药液，每日一剂，早晚分服，给药量290毫升/次，饭后服，服药138天，疼痛基本消失。 凝集素芯片是将各种不同来源的凝集素固定于醛基化、环氧化或经其他方式修饰后的玻璃片基上，再与标记后的糖蛋白、菌体、细胞等待检测样品反应，以检测待检测样品的糖链结构。 治疗：予以上方药，每日一剂，早晚分服，治疗30天后复查，症状减轻，尿量增多，嘱续服137天后，疼痛基本消失，于同年9月14日复查，症状基本消失，体重明显增加，追访壹年仍还健在。 治疗：予以上方药，每日一剂，早晚分服，治疗50天后复查，症状减轻，治疗70天，症状明显改善，治疗138天后，症状基本消失。 治疗：予以上方药，每日一剂，早晚分服，服药后尿量增多，隐痛、胀痛亦缓，食欲佳，服药137天后，疼痛基本消失，经复查：患者左上腹仍有一边缘不清之肿物，伴有轻度压痛，体重较前增加，能做家务活。